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使用马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml配制培养基，马铃薯去皮后切块洗净，加水1000毫升，文火煮沸30分钟后过滤取汁，将琼脂放入液体内文火煮沸，持续搅拌至溶解，培养基煮好后趁热分装试管，塞上棉塞，包扎塑料薄膜，放入灭菌锅，之后拿出斜放，散热后即凝固成斜面培养基。

通过研究显示，灵芝适合生长温度为25-35度，也就是中纬度地区，同时灵芝的生长对于水分、湿度等因素都有一定的要求，综合起来看地处中纬度的泰山就十分适合灵芝的生长。在泰山也有业内以有效成分高而闻名的芝素堂，在此地建立泰山灵芝基地。在泰山建立灵芝基地的还有一个好处就是远离农作物种植区。灵芝孢子粉有周边重金属的特点。

一、准备用品与试剂

主要有各类营养物质、高压灭菌锅、天平、棉塞、试管（20毫米×200毫米）、稀碱液（1摩尔／升ＮａＯＨ溶液，即4克氢氧化钠溶于100毫升水）、稀酸液（1摩尔／升溶液，即84毫升浓加水916毫升）等。

灵芝母种制作技术

二、培养基配方

1、马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml。

2、马铃薯100g、麸皮100克、蔗糖20g、KH2PO41g，MgSO40.5g、琼脂20g、水1000ml。

3、马铃薯200g、蔗糖20g、KH2PO42g，MgSO40.5g、维生素B120毫克、琼脂20g、水1000ml。

溶化后加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、维B1片，并将水补充至1000毫升。即成溶液体培养基。然后将液体培养基趁热分装入试管，装量为试管长度的四分之一。用棉赛堵住试管口，上面用双层牛皮纸包扎后，放入高压锅灭菌。灭菌时，先在夹层内放入适量水，再将分装好培养基的试管放入锅内，盖密切闭加热：先将冷空气排出，然后关闭排气阀，加热升压。

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三、培养基配制

1、马铃薯等块茎、植物根去皮后切块洗净，加水1000毫升，文火煮沸30分钟后过滤取汁，其他各类成分称量要精准，配制流程中葡萄糖要zui后加入，灵芝通常要求PH5.5-6，用稀碱1摩尔/升Na〇H、稀酸1摩尔/升HC1来调整酸碱度至适度为止。将琼脂（若为条形需剪短）放入所配液体内，文火煮沸，煮时持续搅拌至溶解。

2、培养基煮好后趁热分装试管，装量为试管长度的四方之一左右，然后塞上棉塞。倾倒时要预防培养基沾污管口，万一沾上应用纱布擦净。试管要事先洗净，严防油渍。棉塞用未脱脂普通棉花，大小、松紧适中，要求与管壁紧贴。

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四、灭菌与培养

棉塞端包扎塑料薄膜，放入灭菌锅，经高压灭菌后，去除包扎的薄膜，直立于容器或框架内，使管内水蒸气向外界散发，当温度下降至50℃左右时（取试管1支贴放脸上，很烫但能放得住，大概在50℃左右），即可整捆斜放在斜面板上，斜面长度不能超过管长的二分之一，散热后即凝固成斜面培养基。

（六）制造工艺和木腐生菌类方法相同，采用木屑棉籽壳剂型菌种较好。段木时，以菌种含水量略大为好，将散热后的短段木塑料筒预先选择，用气雾消毒盒熏蒸消毒。30分钟后将塑料袋表层的菌种皮弃之，采用双头法。二人配合，一人将塑料扎口绳解开，另一人在酒精火焰口周边将捣成花生仁大小的菌种撒入，并马上封口扎紧。

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